Hb测定大致分为：①根据Hb分子组成，测定总Hb法(全血铁法);②根据血液物理特性测Hb(比重法、折射仪法);③根据Hb与O2可逆性结合的特性测Hb(血气分折法);④根据Hb衍生物光谱特点进行的定量测定等4大类，其中有些方法简单易行，而得到长期广泛应用(如沙利法)，但随着技术的进步和研究的深入，缺点日渐显著，逐渐被淘汰。为统一Hb测定方法，1966年国际血液学标准化委员会推荐氰化高铁Hb测定法作为Hb测定标准法。1978年国际临床化学联合会和世界病理学会联合发表的国际性文件中重申了HiCN法。
其他血红蛋白测定方法：Zander(1984年)提出碱羟Hb(AHD575)测定法，其检出波长为575nm。该法试剂简单。不含有毒剂。呈色稳定，可用氯化血红素作标准品，已被许多单位采用。但由于自动血细胞分析仪或血红蛋白测定仪多采用540nm左右范围滤光板(图为HiCN最大吸收峰在540nm)，限制了此法在该类仪器的使用。
沙利酸化Hb测定法。虽操作简单但误差较大，已被列为县以上医院淘汰的实验项目。
近年来，多参数血细胞分析仪的应用，使Hb测定逐步以仪器法取代手工法，其优点是操作简单、快速，同时可以获得多项红细胞的参数，但由于各型号仪器使用的溶血剂不同，形成Hb的衍生物不同。某些溶血剂形成的衍生物稳定性较差(如2%十六烷基三甲基溴化铵)，因此要严格控制溶血剂加入量及溶血时间，特别是半自动血细胞分析仪需严格控制实验条件。有些溶血剂内虽加入了KCN，但其衍生物并非是HiCN，仪器要经过HiCN标准液校正后，才能进行Hb测定。
正常：
成年男性(120～170)g/L；成年女性(110～150)g/L；新生儿(170～220)g/L。
异常：
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