根据病史、全身症状、假膜特点、粘膜炎症反应明显，剧痛，可明确诊断。涂片检查、细菌培养可协助诊断。诊断时需仔细询问病史及进行检查，以排除其他疾病的继发性感染。

粘膜上皮表层坏死、糜烂，上覆有纤维素性渗出物及坏死细胞、球菌、脓球等形成的假膜，组织水肿，固有层有大量急性炎细胞浸润。

原发性球菌性口炎多见于婴幼儿，偶见成年人。患者起病急、发热、口痛、咽痛、流涎，小儿因疼痛哭闹、拒食，并伴有全身倦怠不适。口腔粘膜充血显著、水肿，继而发生糜烂或溃疡，溃烂面上覆有一层灰黄色纤维素性渗出物形成的假膜，微高于正常粘膜，假膜致密、光滑、湿润似缎面为本病特征。去除假膜后的糜烂面上很快又形成新的假膜。患者疼痛剧烈、口臭，局部淋巴结肿痛。

实验室检查白细胞高，细菌涂片检查可见大量球菌，虽临床上所见多为混合感染，但大都是以某一种为主。不同的球菌感染所致病变部位有所不同，通常金黄色葡萄球菌感染以牙龈部多见，肺炎双球菌好发于硬腭、口底、舌腹及颊粘膜，而链球菌感染多见于唇、颊、软腭、口底和牙槽粘膜。