根据典型的皮疹，结合有无皮肤利什曼病接触史史，在皮损处刮取组织液涂片或进行皮肤病理检查，查到LD小体即可确定诊断。如怀疑此病可用水试验、甲醛凝集试验呈阳性。组织液培养有黑热病鞭毛体生长。亦可用黑热病抗原做补体结合试验或荧光结合试验，阳性率较高。亦有人用抗原作皮内过敏试验，如感染此病皮试呈阳性反应。
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