感染Hp后大多数患者表现隐匿,无细菌感染的全身症状,也常无胃炎的急性期症状,临床上患者往往以慢性胃炎、消化性溃疡等表现就诊。从吞食活菌自愿者试验结果可见,感染先引起急性胃炎,未治疗或未彻底治疗,而发展为慢性胃炎。急性感染潜伏期2~7天,胃镜下表现为胃窦急性充血糜烂,组织学检查黏膜层有充血、水肿及中性粒细胞浸润,症状可表现为腹痛、腹胀、晨起恶心、反酸、嗳气、饥饿感,重者出现呕吐。现已有足够证据表明,Hp是引起慢性胃炎的主要原因。慢性胃炎Hp检出率54%~100%,慢性活动性胃炎Hp检出率为90%以上。不仅引起胃窦炎,也可引起胃体底炎,临床表现无特征性,常见上腹部疼痛、不适、饱胀、嗳气等上消化道症状。胃和十二指肠溃疡(GU&DU)的发生、发展、愈合及复发过程中,Hp起着十分重要的作用。在GU中Hp检出率多在80%以上,DU中检出率多在90%以上。有82.5%的DU患者十二指肠并发胃化生,胃化生和Hp感染是发生DU的先决条件。目前认为根除Hp是治愈和防止溃疡复发的关键。低度恶性胃MALT淋巴瘤一般认为与Hp阳性慢性胃炎相关,根除Hp治疗可使77%~83%胃MALT淋巴瘤消退。因而,提倡对其作积极的Hp根除治疗。长期Hp感染者胃腺癌的发病率增高,并认为与Cag A和Vac A基因有关,产Cag A蛋白和Vac A s1/ml基因型的Hp菌株诱发胃癌的发生率更高。Hp感染还和Barrett食管炎、胃食管反流、功能性消化不良等关系密切。
Hp感染的诊断目前有多种方法,但各种方法均有一定局限性。实际应用中应根据不同条件和目的,作出恰当选择。临床症状及胃镜所见常无特征性,因此临床表现对诊断帮助不大。
1.细菌培养 Hp培养有一定难度,一般用牛脑心浸液琼脂、营养琼脂、空肠弯曲菌培养基础琼脂等,但需加入适量全血或血清(马、羊或人等)、药用炭、可溶性淀粉等添加成分。可直接用黏膜标本划种或将黏膜标本研磨成匀浆后接种,在湿度>90%、微需氧条件(5%O2,7%CO2,80%N2和7%H2)、37℃培养3~5天后观察结果并作鉴定。
2.尿素酶依赖性试验 此试验是鉴于Hp能产生活性很强的尿素酶,分解尿素产生氨和二氧化碳,前者依据pH的改变,后者依据放射性核素(13C或14C)标记的二氧化碳呼出量,从而反映胃内尿素酶活性,以判断有无Hp感染。
(1)快速尿素酶试验(rapid urease test,RUT):是一种简便实用、快速灵敏、准确的方法,适于胃镜检查的患者,在胃镜室内进行,并可迅速获得结果。是临床上诊断Hp感染和证实Hp根除的首选方法。由于Hp在胃内的分布特点,故活检取材部位对结果影响较大。治疗前在胃窦距幽门2~5cm范围,多点取材为好,治疗后应在胃窦和胃体同时取材检测。
(2)尿素呼吸试验(urea breath test,UBT):UBT是一种非侵入性检测Hp感染的方法,不受胃内Hp分布的影响。常用13C-UBT和14C-UBT,13C是稳定性核素,无放射性,可用于小孩和孕妇,但试剂和检测费用较高,14C为放射性核素,试剂费用低、检测方便,但可能造成放射性污染。两者均是有快速、特异、敏感和无痛苦的优点。其单项检测就可作为临床根除Hp治疗后的疗效判断标准。
3.形态学检 Hp具有典现的螺旋状或弯曲状形态。尤其在胃黏膜中,Hp和Hh的形态有特征性,故可通过形态学方法进行诊断。主要包括胃黏膜直接涂片革兰染色镜检和胃黏膜组织切片染色镜检。
(1)黏膜直接涂片:将活检胃黏膜标本的黏膜面直接涂抹于清洁载玻片上,自然干燥固定后革兰染色,油镜下观察10~20个视野,观察涂片的细菌形态和数量,可迅速确定有无Hp感染、感染的程度。由于涂片是对Hp定植部位的黏液进行观察,阳性率很高,且对治疗后残留的少量Hp也可作出诊断。本方法简便易行,适于临床应用。
(2)组织学切片:在对活检标本进行病理组织学观察时,可同用特殊染色进行细菌学检查,还可观察Hp定植的部位及与病变的关系,对于治疗后发生球形变的Hp,可同时行抗Hp抗体的免疫组化染色进行确定。可行Warthin-Starry饱和银染色、改良吉姆萨染色、甲苯胺蓝染色、苯酚复红染色等,其中以Warthin-Starry饱和银染色最好,但较繁琐,多用于科研。改良吉姆萨染色和甲苯胺蓝染色较简便,效果也较好,临床中常用。
4.血清学检查 Hp感染后诱发全身免疫反应,感染者的血清中可出现抗Hp的特异性抗体(IgG和IgA)及抗尿素酶、Vac A、Cag A等的特异性抗体,通过血清学检查可以检出。目前常用的血清学检查方法是ELISA,阳性表是既往或现症感染。近年发展的免疫印迹分析法既可用于诊断Hp感染,又可判别致病菌株。Hp的血清学诊断方法主要适用于流行病学调查。由于Hp根除治疗后血液中的抗Hp抗体并不能迅速降低,故对评价疗效果意义不大。
5.聚合酶链反应(PCR)检查 PCR能检出粪便、胃液、唾液及胃黏膜活检标本中Hp,已有多对引物用于临床检验。检测的基因主要有Hp的特异片段、尿素酶基因Ure A、毒素相关蛋白基因Cag A、致空泡毒素基因Vac A、鞭毛素基因Fla A等。由于PCR的高敏感性及临床标本易污染,而临床应用受限,主要用于科研对Hp进行分型和致病性研究。