C3主要是由巨噬细胞、单核细胞、淋巴组织、骨髓、腹膜和肝脏等合成的一种β球蛋白。C3在C3裂解酶的作用下进一步裂解，参与所有补体的激活。
(1)浇琼脂板时注意避免产生气泡。
(2)稀释血清、抗血清所使用的吸量管必须固定。稀释参考血清和患者血清皆用统一校正过的吸管，否则要用同一根吸管。其他器材也最好统一。
(3)所用琼脂浓度一定要严格控制，分装后防止干燥，不要反复溶解。溶解时不要煮沸时间过长，以防水份蒸发。56℃温度要严格，太热会破坏血清，太冷易凝固。混合要迅速、充分。
(4)加好血清后放的位置一定要保持水平，以防扩散圈变形。
(5)受检者血清须新鲜。如条件不许可，可将血清冰冻保存或稀释后保存，数天之内影响不大，时间久后易使C3值增高。
正常：
单向免疫扩散法0.0094g/L(阴性裂解物<10%)。
异常：
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