主要依靠临床表现及细菌学检查。如果早期临床不能确诊，必要时可做活体组织检查。查体：局部肿块不活动，很快形成脓肿，出现疼痛或热感，表面皮肤呈暗红或紫色，似板状硬，与周围正常组织无明显界限。炎症继续发展，表面皮肤变软，脓肿逐渐破溃，流出淡黄色黏稠脓液。肉眼或取脓液染色检查，均可查见“硫磺颗粒”。破溃排脓后的炎症浸润灶，不久就在其周围又形成新的结节和脓肿，脓肿互相沟通，形成瘘道而转入慢性期，瘘管口有不整齐的肉芽组织。以后若伴有化脓性感染时，还可急性发作，出现急性蜂窝织炎的症状。这种急性炎症与一般炎症不同，虽经切开排脓，炎症可有好转，但放线菌病的局部板状硬性肿胀不会完全消退。愈合后留下紫红色萎缩性瘢痕。