1、病人体液（脑脊液、疱疹液、心包液、胸水等）分离出病毒即可确诊。
2、恢复期血清出现抗体，或双份血清抗体效价增高4倍以上，如发现有柯萨奇病毒以及埃可病毒感染但滴度不高，可以在1周后复查，如果滴度增高4倍以上也具有临床意义。
3、血液检查：血象通常是增高的，淋巴细胞总数增高，且以淋巴细胞比例增高为主。C-反应蛋白常为阴性。
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